Caracterização do tecido ósseo peri-implantar em ratas hipertensas e com deficiência de estrógeno, após ação sinérgica de losartan e alendronato de sódio / Characterization of peri-implant bone tissue in hypertensive and estrogen-deficient rats after the synergistic action of losartan and alendronate sodium

Introdução: Este estudo visou caracterizar morfológica e estruturalmente o tecido produzido na interface osso-implante em ratas espontaneamente hipertensas ovariectomizadas com implantes instalados em suas tíbias, e analisou como o tratamento associado de losartan sistêmico e alendronato de sódio local influenciou no reparo ósseo peri-implantar. Material e Métodos: Foram utilizadas ratas espontaneamente hipertensas (SHR) que receberam losartan (30 mg/kg, p.o.). Após uma semana, implantes de titânio tratados (Medens, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazil) ou não com alendronato de sódio (ALE) foram instalados nas tíbias. Sessenta dias após a implantação, a estabilidade do implante foi avaliada pela medição de torque reverso, considerado como desfecho primário. A microtomografia computadorizada e a análise por confocal foram parâmetros secundários. Resultados: A ação sinérgica do losartan e do alendronato de sódio na superfície do implante aumentou o torque reverso no grupo SHR SHAM ALE. Enquanto a microtomografia também revelou maior extensão de contato entre osso e implante, volume ósseo e espessura trabecular nos animais SHR SHAM ALE. Por último, o losartan e o alendronato de sódio não alterou significativamente os parâmetros de osseointegração nas ratas ovariectomizadas. Conclusões: Os resultados apresentados sugerem que a ação sistêmica do losartan somada à atuação local do alendronato de sódio na superfície dos implantes melhoram os parâmetros de osseointegração em tíbias de ratas hipertensas e não ovariectomizadas(AU)

Background: This study aims to characterize morphologically and structurally the tissue produced at the bone-implant interface in spontaneously hypertensive ovariectomized rats that will have implants placed in their tibiae, and to analyze how the associated treatment of systemic losartan and local sodium alendronate might influence the peri-implant bone healing. Methods: They are used spontaneously hypertensive (SHR) rats that received losartan (30 mg/kg, p.o.). After one week, titanium implants treated (Medens, Ribeirão, São Paulo, Brazil) or not with sodium alendronate (ALE) were installed in the tibiae. Sixty days after implantation, implant stability was assessed by measuring the removal torque considered the primary end point. Computed tomography and confocal analysis were secondary parameters. Results: The synergistic action of losartan and sodium alendronate on the implant surface increased the reverse torque in the SHR SHAM ALE group. While microtomography also revealed a greater extent of contact between bone and implant, bone volume and trabecular thickness in SHR SHAM ALE animals. Finally, losartan and sodium alendronate did not significantly alter osseointegration parameters in ovariectomized rats. Conclusions: The results presented suggest that systemic losartan plus the local action of sodium alendronate on implants surface improves osseointegration parameters in tibias of hypertensives and non-ovariectomized rats(AU)

Quantification of DNA Damage in Different Tissues in Rats with Heart Failure / Quantificação de Dano em DNA em Diferentes Tecidos em Ratos com Insuficiência Cardíaca

Abstract Background: Chronic heart failure (CHF) is a complex syndrome which comprises structural and functional alterations in the heart in maintaining the adequate blood demand to all tissues. Few investigations sought to evaluate oxidative DNA damage in CHF. Objective: To quantify the DNA damage using the comet assay in left ventricle (LV), lungs, diaphragm, gastrocnemius and soleus in rats with CHF. Methods: Twelve male Wistar rats (300 to 330 g) were selected for the study: Sham (n = 6) and CHF (n = 6). The animals underwent myocardial infarction by the ligation of the left coronary artery. After six weeks, the animals were euthanized. It was performed a cell suspension of the tissues. The comet assay was performed to evaluate single and double strand breaks in DNA. Significance level (p) considered < 0.05. Results: The CHF group showed higher values of left ventricle end-diastolic pressure (LVEDP), pulmonary congestion, cardiac hypertrophy and lower values of maximal positive and negative derivatives of LV pressure, LV systolic pressure (p < 0.05). CHF group showed higher DNA damage (% tail DNA, tail moment and Olive tail moment) compared to Sham (p < 0.001). The tissue with the highest damage was the soleus, compared to LV and gastrocnemius in CHF group (p < 0.05). Conclusion: Our results indicates that the CHF affects all tissues, both centrally and peripherically, being more affected in skeletal muscle (soleus) and is positively correlated with LV dysfunction.

Resumo Fundamento: A insuficiência cardíaca crônica (ICC) é uma síndrome complexa que compreende alterações estruturais e funcionais no coração, mantendo demanda sanguínea adequada a todos os tecidos. Poucas investigações procuraram avaliar o dano oxidativo ao DNA na ICC. Objetivo: Quantificar o dano ao DNA utilizando o ensaio cometa no ventrículo esquerdo (VE), pulmões, diafragma, gastrocnêmio e sóleo em ratos com ICC. Métodos: Doze ratos Wistar machos (300 a 330 g) foram selecionados para o estudo: placebo (n = 6) e ICC (n = 6). Os animais foram submetidos a infarto do miocárdio através de ligadura da artéria coronária esquerda. Após seis semanas, os animais foram sacrificados. Foi realizada uma suspensão celular dos tecidos. O ensaio cometa foi realizado para avaliar as quebras de fita simples e dupla no DNA. Nível de significância (p) < 0,05. Resultados: O grupo ICC apresentou maiores valores de pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE), congestão pulmonar, hipertrofia cardíaca e menores valores de derivados máximos positivos e negativos da pressão do VE, pressão sistólica do VE (p < 0,05). O grupo ICC apresentou maior dano ao DNA (% de DNA da cauda, momento da cauda e momento da cauda de Olive) em comparação ao placebo (p < 0,001). O tecido com maior dano foi o sóleo, comparado ao VE e ao gastrocnêmio no grupo ICC (p < 0,05). Conclusão: Nossos resultados indicam que a ICC afeta todos os tecidos, de maneira central e periférica, sendo mais afetada no músculo esquelético (sóleo) e está positivamente correlacionada com a disfunção do VE.

STRENGTH TRAINING AND ANABOLIC STEROID DO NOT AFFECT MUSCLE CAPILLARIZATION OF MIDDLE-AGED RATS / TREINAMENTO DE FORÇA E ESTEROIDE ANABOLIZANTE NÃO AFETAM A CAPILARIZAÇÃO MUSCULAR DE RATOS DE MEIA-IDADE / ENTRENAMIENTO DE FUERZA Y ESTEROIDE ANABOLIZANTE NO AFECTAN LA CAPILARIDAD MUSCULAR DE RATAS DE MEDIANA EDAD

ABSTRACT Introduction: It is generally accepted that the capillary network decreases with advancing age. The combined effect of resistance training (RT) and testosterone still needs to be elucidated. Objective: This study aimed to measure capillary profile of different skeletal muscles of middle-aged rats undergoing RT and administration of exogenous testosterone. Methods: Wistar rats were divided into five experimental groups: control with 13-month-old rats (SC), control with 16-month-old rats (SE), aged rats + anabolic agent (SA), aged rats + RT (T), and aged rats + RT + anabolic agent (TA). Results: For soleus, the SE group presented a decrease in the percentage of capillaries in comparison to SC group. SA, T, and TA groups had increased capillary volume in comparison to SC. As for the extensor digitorum longus (EDL), SA, T, and TA groups demonstrated lower capillary volume and numeric density in comparison to SC and SE. The EDL of the T and TA groups presented 70% less capillaries than soleus. The numerical and volumetric density and capillary ratio by muscle fiber were not statistically altered by any intervention. The cross-sectional area (CSA) of the soleus of the SA, T and TA groups was statistically different from SC group. The soleus CSA was greater in the TA and T groups than in the SC, SE and SA groups, and the EDL CSA was greater in the TA compared to all other groups. The TA group had greater values than the SE, SA, and T groups. Conclusion: The type of intervention used did not affect any variables measured in the capillary profile. However, the use of anabolic steroid and/or RT showed a tendency to decrease the density of capillaries in the EDL.

RESUMO Introdução: Em geral, se aceita que a rede capilar diminui com o avanço da idade. O efeito combinado de treinamento resistido (TR) e testosterona ainda precisa ser elucidado. Objetivo: Este estudo visou medir o perfil capilar de diferentes músculos esqueléticos em ratos de meia-idade submetidos a TR e administração de testosterona exógena. Métodos: Ratos Wistar foram divididos em cinco grupos experimentais: controle com ratos de 13 meses de idade (SC), controle com ratos de 16 meses de idade (SE), ratos idosos + anabolizante (SA), ratos idosos + TR (T) e ratos idosos + TR + anabolizante (TA) . Resultados: Para o músculo sóleo, o grupo SE apresentou decréscimo do percentual de capilares em comparação com o grupo SC. Os grupos SA, T e TA tiveram aumento do volume de capilares em comparação com o SC. Por outro lado, para o músculo extensor longo dos dedos (ELD), os grupos SA, T e TA demonstraram menor volume e densidade numérica de capilares, em comparação com SC e SE. O músculo ELD dos grupos T e TA apresentou 70% menos capilares do que o sóleo. A densidade numérica e volumétrica e a razão de capilares por fibra muscular não foram estatisticamente alteradas por nenhuma das intervenções. A área de corte transversal (ACT) do músculo sóleo dos grupos SA, T e TA foi estatisticamente diferente do grupo SC. A ACT do sóleo foi maior nos grupos TA e T do que nos grupos SC, SE e SA e a ACT do ELD foi maior no grupo TA comparada com todos os outros grupos. O grupo TA teve valores maiores do que os grupos SE, SA e T. Conclusão: O tipo de intervenção usada não afetou qualquer variável mensurada do perfil capilar. Entretanto, o uso de esteroide anabolizante e/ou TR mostrou tendência de diminuir a densidade de capilares no músculo ELD.

RESUMEN Introducción: Se acepta en general que la red capilar disminuye con la edad. El efecto combinado de entrenamiento de resistencia (ER) y la testosterona todavía necesita ser aclarado. Objetivo: Este estudio tuvo como objetivo medir el perfil capilar de diferentes músculos esqueléticos de ratas de mediana edad sometidas a ER y la administración de testosterona exógena. Métodos: Se dividieron ratas Wistar en cinco grupos: control con ratas de 13 meses de edad (SC), control con ratas de 16 meses de edad (SE), ratas de edad avanzada + anabolizantes (SA), ratas de edad avanzada + ER (T) y ratas de edad avanzada + ER + anabolizante (TA). Resultados: Para el músculo sóleo, el grupo SE mostró una disminución en el porcentaje de capilares en comparación con el grupo SC. Los grupos SA, T y TA presentaron aumento del volumen de capilares en comparación con el SC. Por otro lado, para el músculo extensor largo de los dedos (ELD), los grupos SA, T y TA mostraron menor volumen y menor número de capilares en comparación con los grupo SC y SE. El músculo ELD de los grupos T y TA presentó 70% menos capilares que el sóleo. La densidad numérica y volumétrica y la proporción de capilares por fibra muscular no se alteraron significativamente por ninguna de las intervenciones. El área de sección transversal (AST) del músculo sóleo de los grupos SA, T y TA fue estadísticamente diferente que el grupo SC. El AST del sóleo fue mayor en los grupos TA y T que en los grupos SC, SE y SA, y el AST del ELD fue mayor en el grupo TA en comparación con todos los demás grupos. El grupo TA tuvo valores más altos que los grupos SE, SA y T. Conclusión: El tipo de intervención utilizada no afecta a ninguna variable medida del perfil capilar. Sin embargo, el uso de esteroides anabolizantes y/o ER tendió a reducir la densidad capilar en el músculo ELD.

Imunomarcação para TRAP em tecido de reparação óssea de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) tratados com Atenolol / Immunostaining for TRAP in bone healing tissue of Spontaneously Hypertensive Rats (SHR) treated with Atenolol

Introdução: A hipertensão arterial tem sido um dos maiores problemas de saúde no mundo, com grandes alterações para as doenças cardiovasculares e renais. O tecido ósseo tem função importante no suporte, proteção e locomoção e está sob o controle de fatores sistêmicos como hormônios e fatores locais, entre eles os fatores de crescimento e citocinas. A Fosfatase Ácida Tartarato Resistente (TRAP) é uma enzima que faz parte da família das fosfatases ácidas e apresenta localização intracelular; mais especificamente dentro do compartimento lisossomal de osteoclasto, macrófagos e células dendríticas, tem sido utilizada como um marcador histoquímico da atividade osteoclástica. Objetivos: Avaliar a expressão da proteína TRAP em alvéolos dentários de ratos hipertensos (SHR) e normotensos tratados ou não com atenolol. Métodos: Neste estudo foram utilizados 4 grupos de ratos sendo: 1) W (wistar sem tratamento), 2) WT (wistar tratado com atenolol), 3) S (SHR sem tratamento) e 4) ST (SHR tratado com atenolol), submetidos a exodontia do incisivo superior direito, com eutanásia no 7º, 14º, 21 e 28º dia pós-operatório. A análise dos mecanismos biológicos envolvidos no processo de reparo alveolar foi obtida pela análise da expressão de proteínas TRAP por meio da técnica de imunoistoquímica. Os resultados foram analisados pela média e erro padrão da média e aplicado o teste paramétrico ANOVA, com pos-test de Tukey para avaliar os períodos dentro de cada grupo e entre os grupos, sendo consideradas as diferenças significativas quando p<0,05. Resultados: Os resultados mostraram que a marcação TRAP aumenta em alvéolo dentais de ratos Wistar durante todos os períodos pós ­ operatórios. A marcação TRAP aumenta apenas ao 14o nos dias de reparação alveolar em alvéolo dental de SHR não tratados. O atenolol não altera o processo de reparo alveolar em ratos Wistar, porém o atenolol promoveu a redução da marcação de TRAP em SHR ao 14º dia. Conclusão: A hipertensão aumenta a expressão da proteína TRAP no 14o dia pós-cirúrgico de reparação alveolar e o atenolol promove redução da marcação aumentada de TRAP ao 14º dia pós-cirúrgico em alvéolos de SHR(AU)

Introduction: Arterial hypertension has been one of the world's biggest health problems, with considerable alterations for cardiovascular and renal diseases. The bone tissue has an important role in support, protection and locomotion and is controlled by systemic factors like hormones and local factors, such as growth factors and cytokines. The Tartrate-resistant Acid Phosphatase (TRAP) is an enzyme that belongs to the Acid Phosphatases family and has an intracellular location, more specifically inside the lysosomal compartment of osteoclasts, macrophages and dendritic cells. It has been used as a histochemical marker of the osteoclast activity. Objectives: Evaluate TRAP protein's expression in the dental alveoli of normotensive and hypertensive rats (SHR) treated or not treated with Atenolol. Methods: In this study, four groups of rats were used: 1) W (with no treatment), 2) WT (wistar treated with Atenolol), 3) S (SHR without treatment) and 4) ST (SHR treated with Atenolol), all of which underwent exodontia of the upper right incisor with euthanasia on the 7th, 14th, 21st and 28th day after the operation. The analysis of the biological mechanisms involved in the process of alveolar repair was obtained by the expression of TRAP proteins in the alveolar process through an immunohistochemistry technique. The results were analyzed through the average and its standard error. The parametric test ANOVA was applied with Tukey's posttest were applied to evaluate the periods within each group and between the groups, considering the significant differences when p< 0,05. Results: The results demonstrated that TRAP staining increases in the dental alveoli of Wistar rats during all the post-surgical periods. TRAP staining increases only on the 14th day of alveolar recovery in the dental alveoli of non-treated SHR. Atenolol does not change the process of alveolar repair in Wistar rats, but Atenolol promoted the reduction of TRAP staining among SHR on the 14th day. Conclusion: Hypertension increases the expression of TRAP proteins on the 14th alveolar recovery postsurgical day and Atenolol promotes the reduction of the increased TRAP staining on the 14th postsurgical day in SHR's alveoli(AU)

Efeito vasorelaxante do doador de óxido nítrico [Ru(terpy)(bdq)NO]3+ (TERPY) em artéria de resistência e sua interação com a óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) de Ratos Espontaneamente Hipertensos (SHR) / Vasorelaxation effect of nitric oxide donor [Ru(terpy)(bdq)NO]3+ (TERPY) on resistance artery and its interaction with endothelial nitric oxide synthase (eNOS) of Spontaneously Hypertensive Rats (SHR)

O TERPY promove efeito hipotensor de maior magnitude em ratos hipertensos (SHR e 2R-1C) do que em ratos normotensos (Wistar e 2R). Foi demonstrado anteriormente que o endotélio prejudica o efeito vasodilatador do TERPY em aorta de Wistar. No entanto, observamos que o endotélio melhora os efeitos vasodilatadores do TERPY em aorta de SHR. Vasos sanguíneos de menor calibre, tais como as artérias de resistência, estão associadas ao controle da resitência vascular periférica e da pressão arterial. Nossa hipótese é que o TERPY induz relaxamento nas artérias mesentéricas de resistência em SHR e que as células endoteliais modulam positivamente o efeito do TERPY nestes vasos sanguíneos. Portanto, o nosso objetivo foi avaliar o efeito vasodilatador do TERPY em anéis com e sem endotélio de artéria mesentérica de ratos SHR, o seu mecanismo de relaxamento e a participação da NOS sobre esse efeito. e a Nossos resultados mostraram que o TERPY induziu um efeito vasodilatador dependente da concentração em anéis de artérias mesentéricas (2º e 3º ramos) de SHR e de ratos Wistar. A potência do TERPY foi maior em anéis intactos do que em anéis sem endotélio em artérias mesentéricas de SHR, mas em Wistar o endotélio prejudicou o efeito do TERPY. Nas artérias mesentéricas sem endotélio de SHR, o efeito do TERPY é dependente da atividade da guanilato ciclase solúvel e de canais para potássio. Nas artérias mesentéricas intactas de SHR, o efeito de TERPY depende da atividade de eNOS, mas não é dependente das atividades de nNOS, iNOS ou da via da ciclooxigenase. O TERPY promove a fosforilação da eNOS nos resíduos de serina1177 e aumenta a concentração de óxido nítrico em células endoteliais isoladas de artérias mesentéricas de SHR. Nossos resultados mostraram que a guanilato ciclase solúvel, os canais para potássio e a eNOS estão envolvidos no efeito vasodilatador estimulado pelo TERPY nas artérias de resistência mesentérica de SHR. Numa segunda parte deste estudo, avaliamos o mecanismo de ação de TERPY e seu efeito sobre a atividade da eNOS em células endoteliais. As células HUVEC, WT-HEK e HEK-eNOS foram tratadas com TERPY em diferentes tempos (0 a 60 minutos). Foram analisados por Western blotting o efeito do TERPY sobre a fosforilação de eNOS, monômero e dímero da eNOS e sobre monômero e oligômero de caveolina-1. Também foi avaliado o efeito do TERPY na interação eNOS/Cav-1 através de co-imunoprecipitação. As alterações induzidas pelo TERPY sobre as concentrações de espécies reativas de oxigênio e peroxinitrito em células endoteliais foram medidas usando sonda DHE e biossensor 7-CBA, respectivamente. A concentração de óxido nítrico (NO) foi avaliada por sonda DAF-FM e sensor Cooper. O TERPY promoveu desacoplamento e disfunção da eNOS, dependente de BH4. A desestabilização dos oligômeros da caveolina-1 foi induzida pelo TERPY. Consequentemente, o TERPY reduziu a interação eNOS/Cav-1 e promoveu ativação da eNOS. Nossos resultados mostraram que a atividade da eNOS pode ser regulada de duas maneiras diferentes pelo TERPY. O TERPY promove desacoplamento e fosforilação da eNOS, promovendo uma estratégia diferente para a regulação da atividade desta enzima. As moléculas químicas ou biológicas como o TERPY que regulam a atividade da eNOS e aumentam a produção e a biodisponibilidade de NO teriam ações terapêuticas importantes para o tratamento de doenças vasculares associadas a hipertensão(AU)

TERPY promotes a hypotensive effect with greater magnitude in hypertensive rats (SHR and 2K-1C) than in normotensive rats (Wistar and 2K). Previously, it was demonstrated that endothelium impairs vasodilatory effect of TERPY in Wistar aorta. However, we observed that endothelium improves the vasodilatory effect of TERPY in SHR aorta. Smaller blood vessels, such as mesenteric arteries, are associated with the control of peripheral vascular resistance and blood pressure. We hypothesized that TERPY induces relaxation on mesenteric resistance arteries in SHR and endothelial cells modulate positively the TERPY's effect on these blood vessels. Therefore, our goal was to evaluate the vasodilator effect of TERPY in rings with and without endothelium of mesenteric arteries in SHR, the mechanism of relaxation and the participation of NOS on this effect. Our results show TERPY induced a concentration-dependent vasodilator effect in mesenteric arteries (2nd and 3 rd branches) rings from SHR and Wistar. The potency of TERPY was higher in intact than in denuded rings from SHR, but in Wistar, endothelium impair the TERPY's effect. In denuded mesenteric arteries from SHR, the relaxation effect induced by TERPY is dependent of soluble guanylate cyclase and activation of potassium channel. However, in intact mesenteric arteries from SHR, TERPY´s effect is modulated by eNOS activity, but it is not dependent of nNOS, iNOS or cyclooxygenase pathway activities. TERPY promotes eNOS3 Ser1177 phosphorylation and increases nitric oxide concentration in isolated endothelial cells of mesenteric arteries from SHR. Together, our results showed that soluble guanylate cyclase, potassium channels, and eNOS are involved in the vasodilator effect of TERPY in mesenteric resistance arteries from SHR. In a second part of this study, we aimed to evaluate the mechanism of action of TERPY and its effect on eNOS activity in endothelial cells. HUVEC, WT-HEK and HEK-eNOS cells were treated with TERPY at different times (0 to 60 minutes). Were analyzed by western blotting the TERPY`s effect on eNOS monomer, dimer and phosphorylation and on monomer and oligomer of caveolin-1. It was also evaluated the effect of TERPY in the interaction between eNOS/Cav-1 through co-immunoprecipitation. Alterations induced by TERPY on reactive oxygen species and peroxynitrite concentrations in endothelial cells were measured by using DHE probe and biosensor 7-CBA, respectively. Nitric oxide fluorescence was assessed by DAF-FM probe and Cooper sensor. TERPY promoted eNOS uncoupling and eNOS dysfunction, which is BH4-dependent. Caveolin-1 oligomers destabilization was induced by TERPY. Consequently, TERPY reduced eNOS/Cav-1 interaction and promoted eNOS activation. Our results show that eNOS activity can be regulated in two different ways by TERPY, leading to eNOS uncoupling and leading to eNOS phosphorylation, promoting a strategy for eNOS regulation. Chemical or biological molecules as TERPY that regulates eNOS activity and increase NO production and bioavailability are potential therapeutic drugs for the treatment of vascular diseases associated with hypertension(AU)

Efeito do exercício físico e suplementação de potássio sobre a pressão arterial, metabolismo glicídico e albuminúria de ratos hipertensos / Effects of physical training and potassium supplementation on blood pressure, glucose metabolism and albuminuria of spontaneously hypertensive rats

Introdução: Ainda é controverso se ocorre sinergismo entre as diferentes medidas não farmacológicas utilizadas no tratamento da hipertensão arterial. Objetivo: Avaliar o efeito do exercício físico aeróbico, da sobrecarga oral de potássio e da sua associação sobre a pressão arterial, metabolismo glicídico, excreção urinária de albumina e morfologia glomerular de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Métodos: SHRs foram divididos em: Grupo Controle (SHR; dieta padrão e sedentário, n = 10); Grupo Exercício (SHR + E; treinado em esteira rolante, dieta padrão, n = 10), Grupo Potássio (SHR + K; sedentário, dieta rica em potássio, n = 10) e Grupo Exercício + Potássio (SHR + E + K; exercitado, dieta rica em potássio, n = 10). Semanalmente, foi aferido o peso corporal (PC) e a pressão arterial de cauda (PAC). Ao final de 16 semanas, foi realizado o Teste de Tolerância oral a Glicose. A albuminúria foi determinada nos períodos basal, na 8ª e 16ª semana. Após o sacrifício, foi realizada a análise do índice de esclerose glomerular e a pesagem da gordura visceral. Resultados: A PAC e o PC não variaram significativamente. Houve melhora da sensibilidade à insulina no Grupo Exercício e Grupo Potássio, mas não no Grupo Exercício + Potássio. Na 16ª semana, a albuminúria de todos os grupos foi significativamente menor que o grupo SHR Controle. O índice de esclerose glomerular e o peso da gordura visceral também foram significativamente menores em todos os grupos tratados quando comparados ao controle. Conclusão: A dieta rica em potássio e o exercício físico determinaram melhora no metabolismo glicídico, na albuminúria e na morfologia glomerular, porém, a sobreposição ...

Introduction: It is still controversial whether there are synergistic effects among different non-pharmacological interventions used in the treatment of hypertension. Objetives: To evaluate the effect of aerobic exercise, oral supplementation of potassium and their combination on blood pressure, glucose metabolism, urinary albumin excretion and glomerular morphology in spontaneously hypertensive rats (SHR). Methods: SHR were divided into groups: Control Group (SHR; standard diet and sedentary, n = 10), Exercise Group (SHR + E; trained on a treadmill, standard diet, n = 10), Potassium Group (SHR + K; sedentary, potassium supplementation, n = 10) and Group Exercise + Potassium (SHR + E + K, exercise, potassium supplementation n = 10). Weekly, body weight (BW) and tail blood pressure (TAP) were measured. At the end of 16 weeks, a Oral Glucose Tolerance Test was performed. Albuminuria was determined in the baseline period, at 8th and at 16th week. After sacrifice, the analysis of glomerular sclerosis index and visceral fat weight was performed. Results: The TAP and BW did not change significantly. There was improvement in insulin sensitivity in SHR + E and SHR + K, but not in SHR + E + K. At week 16, albuminuria in all groups was significantly lower than the SHR control. The glomerular sclerosis index and visceral fat content were also significantly lower in all groups compared to control. Conclusion: An oral supplementation of potassium and exercise led to an improvement in glucose metabolism, in albuminuria and glomerular morphology, however, the overlap of the treatments did not show synergism. .

Estudo da degradação da proteína Tau hiperfosforilada por vias independentes do proteassoma, em modelo experimental de neurodegeneração / Study of hyperphosphorylated Tau protein degradation by proteasome-independent pathways, in an experimental model of neurodegeneration

O desenvolvimento das doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer, está associado à presença de agregados proteicos contendo Tau hiperfosforilada (p-Tau). Esta disfunção da Tau leva a prejuízos na homeostase celular. Um mecanismo chave para diminuir e/ou prevenir os danos promovidos pelos agregados contendo Tau seria o estímulo de sua degradação. Neste sentido, a proposta do presente estudo foi analisar a degradação da proteína Tau após aumento da expressão exógena da cochaperona Bag-2, a qual influencia o sistema proteassomal de degradação; bem como avaliar a ativação dos sistemas de degradação, a fim de correlacionar estes sistemas em cultura de células primárias e organotípica do hipocampo de ratos. Os resultados mostraram que a rotenona foi capaz de aumentar os níveis de p-Tau e que a superexpressão de Bag-2, foi eficiente em prevenir e degradar a p-Tau. O mecanismo envolvido neste processo envolve a coordenação dos sistemas proteassomal e lisossomal, já que a Rab7 e a Rab24 (envolvidas na via lisossomal) mostraram-se diminuídas na fase que antecede a agregação proteica, enquanto houve aumento da Rab24 na presença dos agregados proteicos. Com relação ao peptídeo beta amiloide, foi demonstrado tendência de aumento de p-Tau acompanhado de diminuição da atividade proteassomal e lisossomal. O tratamento com PADK (ativador lisossomal) foi capaz de reverter este efeito nestas diferentes condições. A análise da interrelação entre os sistemas mostrou que uma inibição do proteassoma favorece a via lisossomal e que o inverso não se repete. Os resultados sugerem que a modulação das vias de degradação pode ser interessante para o estudo, prevenção e tratamento das doenças neurodegenerativas associadas à agregação de proteínas...

Neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's, are associated to protein inclusions containing hyperphosphorylated Tau (p-Tau). It is well established that Tau dysfunction impairs cell homeostasis. A key mechanism to prevent and/or reduce the damage promoted by aggregates of Tau might be its degradation. In view of this, the aims of the present study are to evaluate p- Tau clearance following exogenous expression of Bag-2, which stimulates proteasome; as well as to analyze the activation of both lysosome and proteasome pathways in order to understand the crosstalk between these two systems in primary and organotypic cultures of rat hippocampus. Results showed that rotenone was able of increasing p-Tau that was prevented and degraded by Bag-2 overexpression. Mechanisms involved in this process involve the coordination of cell degradation systems, depending upon aggregation status, since Rab7 and Rab24 (involved in lysosomal pathway) were decreased before protein aggregation, while Rab24 increased in the presence of protein inclusions. Amyloid-beta peptide also increased p-Tau accompanied by decreased proteasome and lysosome activity. PADK (lysosomal activator) treatment reverted the inhibition promoted by amyloidbeta peptide. Inhibition of proteasome leads to activation of lysosome, but lysosome inhibition does not affect proteasome. Overall, results suggest that targeting degradation pathways might be useful to understand, prevent and treat neurodegenerative diseases associated with protein deposits...

Caracterização de osteoblastos diferenciados de células-tronco mesenquimais da medula óssea de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) / Characterization of osteoblasts differentiated from mesenchymal stem cells from spontaneously hypertensive rats (SHR) bone marrow

A hipertensão arterial representa um fator de risco sistêmico para várias doenças incluindo redução da massa óssea por aumentar a reabsorção e diminuir a formação óssea. Considerando que a formação óssea é resultante da atividade de osteoblastos, o objetivo deste estudo foi avaliar as características fenotípicas e genotípicas de células osteoblásticas diferenciadas de CTMs (células-tronco mesenquimais) de SHR. A partir de medulas ósseas de fêmures de SHR, CTMs foram obtidas por adesão ao plástico de cultura de células e diferenciadas em osteoblastos por cultura em meio osteogênico até que atingissem a subconfluência. Em seguida, as células foram subcultivadas na densidade de 2x104 células/poço em placas de 24 poços. Células obtidas de Wistar foram utilizadas como controle. Para a avaliação das respostas celulares foram realizados ensaios de proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de matriz mineralizada e expressão gênica dos marcadores osteoblástico: 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX), 3) Fosfatase alcalina (ALP), 4) Proteína óssea morfogenética 2 (BMP2); 5) Sialoproteína óssea (BSP), 6) Osteocalcina (OC), 7) Osteopontina (OPN), 8) e Colágeno (COL), além dos receptores β1 e β2 adrenérgicos. Os dados foram comparados pelo teste ANOVA seguido do teste de Tukey, e o nível de significância adotado foi de 5% (p≤0,05). Células osteoblásticas de SHR apresentaram alterações no fenótipo osteoblástico, exibindo, em todos os períodos avaliados, menor proliferação celular, atividade de ALP e formação de matriz mineralizada. A expressão gênica de todos os marcadores ósseos também foi menor em SHR quando comparado com Wistar na maioria dos períodos avaliados. A expressão gênica do receptor β2 adrenérgico foi maior em SHR em todos os períodos avaliados e não foi detectada a expressão do receptor β1 tanto em SHR como em Wistar. Com base nesses resultados, podemos concluir que os osteoblastos diferenciados das CTMs...

Hypertension is a systemic risk factor for several diseases including reduction of bone mass by increasing bone resorption and reducing bone formation. Considering that bone formation results from osteoblast activity, the aim of this study was to assess the phenotypic and genotypic characteristics of osteoblastic cells differentiated from MSCs of SHR. Bone marrow was harvested from SHR femurs and MSCs were selected by adherence to plastic cell culture and differentiated into osteoblasts by culturing in osteogenic medium until subconfluence. Then, the cells were subcultured at a density of 2x104 cells / well in 24 well plates. Cells from Wistar rats were used as control. Cells responses were evaluated by assaying proliferation, alkaline phosphatase activity (ALP), mineralized matrix formation and the gene expression of the osteoblastic markers: runt-related 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX) 3) Alkaline phosphatase (ALP), 4) Bone morphogenetic protein 2 (BMP2); 5) Bone sialoprotein (BSP), 6) Osteocalcin (OC), 7) Osteopontin (OPN), 8) and Collagen type 1 alpha (COL), in addition to the gene expression of β1 and β2 adrenergic receptors. Data were compared by ANOVA followed by Tukey test and the level of significance was 5% (p ≤ 0.05). SHR derived osteoblasts showed changes in osteoblastic phenotype, exhibiting in all periods reduced cell proliferation, ALP activity and mineralized matrix formation. The gene expression of all bone markers was also lower in SHR compared with Wistar in many periods. The gene expression of the β2 adrenergic receptor was greater in SHR in all periods and it was not detected the expression of β1receptor either in SHR or Wistar. Based on these results, we conclude that osteoblasts differentiated from SHR MSCs exhibit reduced or delayed in the differentiation process. We also suggest that overexpression of β2 adrenergic receptors may have acted in prejudice of osteoblastic differentiation...

Caracterização de osteoblastos diferenciados de células-tronco mesenquimais da medula óssea de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) / Characterization of osteoblasts differentiated from mesenchymal stem cells from spontaneously hypertensive rats (SHR) bone marrow

A hipertensão arterial representa um fator de risco sistêmico para várias doenças incluindo redução da massa óssea por aumentar a reabsorção e diminuir a formação óssea. Considerando que a formação óssea é resultante da atividade de osteoblastos, o objetivo deste estudo foi avaliar as características fenotípicas e genotípicas de células osteoblásticas diferenciadas de CTMs (células-tronco mesenquimais) de SHR. A partir de medulas ósseas de fêmures de SHR, CTMs foram obtidas por adesão ao plástico de cultura de células e diferenciadas em osteoblastos por cultura em meio osteogênico até que atingissem a subconfluência. Em seguida, as células foram subcultivadas na densidade de 2x104 células/poço em placas de 24 poços. Células obtidas de Wistar foram utilizadas como controle. Para a avaliação das respostas celulares foram realizados ensaios de proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de matriz mineralizada e expressão gênica dos marcadores osteoblástico: 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX), 3) Fosfatase alcalina (ALP), 4) Proteína óssea morfogenética 2 (BMP2); 5) Sialoproteína óssea (BSP), 6) Osteocalcina (OC), 7) Osteopontina (OPN), 8) e Colágeno (COL), além dos receptores β1 e β2 adrenérgicos. Os dados foram comparados pelo teste ANOVA seguido do teste de Tukey, e o nível de significância adotado foi de 5% (p≤0,05). Células osteoblásticas de SHR apresentaram alterações no fenótipo osteoblástico, exibindo, em todos os períodos avaliados, menor proliferação celular, atividade de ALP e formação de matriz mineralizada. A expressão gênica de todos os marcadores ósseos também foi menor em SHR quando comparado com Wistar na maioria dos períodos avaliados. A expressão gênica do receptor β2 adrenérgico foi maior em SHR em todos os períodos avaliados e não foi detectada a expressão do receptor β1 tanto em SHR como em Wistar. Com base nesses resultados, podemos concluir que os osteoblastos diferenciados das CTMs de...

Hypertension is a systemic risk factor for several diseases including reduction of bone mass by increasing bone resorption and reducing bone formation. Considering that bone formation results from osteoblast activity, the aim of this study was to assess the phenotypic and genotypic characteristics of osteoblastic cells differentiated from MSCs of SHR. Bone marrow was harvested from SHR femurs and MSCs were selected by adherence to plastic cell culture and differentiated into osteoblasts by culturing in osteogenic medium until subconfluence. Then, the cells were subcultured at a density of 2x104 cells / well in 24 well plates. Cells from Wistar rats were used as control. Cells responses were evaluated by assaying proliferation, alkaline phosphatase activity (ALP), mineralized matrix formation and the gene expression of the osteoblastic markers: runt-related 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX) 3) Alkaline phosphatase (ALP), 4) Bone morphogenetic protein 2 (BMP2); 5) Bone sialoprotein (BSP), 6) Osteocalcin (OC), 7) Osteopontin (OPN), 8) and Collagen type 1 alpha (COL), in addition to the gene expression of β1 and β2 adrenergic receptors. Data were compared by ANOVA followed by Tukey test and the level of significance was 5% (p ≤ 0.05). SHR derived osteoblasts showed changes in osteoblastic phenotype, exhibiting in all periods reduced cell proliferation, ALP activity and mineralized matrix formation. The gene expression of all bone markers was also lower in SHR compared with Wistar in many periods. The gene expression of the β2 adrenergic receptor was greater in SHR in all periods and it was not detected the expression of β1receptor either in SHR or Wistar. Based on these results, we conclude that osteoblasts differentiated from SHR MSCs exhibit reduced or delayed in the differentiation process. We also suggest that overexpression of β2 adrenergic receptors may have acted in prejudice of osteoblastic differentiation

Effect of chronic cortisone use in rats strain susceptible to ligature-induced periodontitis / Efeito do uso crônico da cortisona em ratas de linhagem susceptível à periodontite induzida por ligadura

Objective: The present study assessed the effect of prolonged betamethasone use in ligature-induced periodontitis in adult Fischer-344 rats. Methods: Thirty-six Fisher rats were randomly assigned to three groups: group B (betamethasone); group S (sham) and group C (control). The animals in group B were given intramuscular betamethasone daily, those in group S were given saline injections daily, and those in group C were not submitted to any intervention. The interventions lasted 60 days, and all groups were submitted to the same environmental conditions. Tendays after starting the injections, periodontal disease was induced in the animals from groups B and S by tying a sterile silk suture threadaround the upper right second molar. Fifty days later, all animals were sacrificed and the connective tissue attachment level (Jac-E) and boneloss (Jac-O) were measured. Results: Jac-E and Jac-O of groups B and S were not significantly different, but they differed significantly from those of group C. Conclusion: Prolonged use of betamethasone did not affect the progression of induced periodontitis in rats.

Objetivo: Avaliar o efeito do uso prolongado da betametasona na periodontite induzida por ligadura, em ratas adultas da linhagem Fischer-344. Métodos: Selecionou-se trinta e seis ratas Fisher, as quais foram divididas aleatoriamente em três grupos: grupo B (betametasona); grupo S (soro) e grupo C (controle). Os animais do grupo B receberam injeções diárias intramuscular de betametasona, o grupo S recebeu injeções diárias de soro fisiológico e o grupo C foi mantido sem nenhuma intervenção. Estes procedimentos duraram 60 dias. Os três grupos foram mantidos nas mesmas condições ambientais. Decorridos dez dias a partir do início das injeções, os animais dos grupos B e S foram submetidos a indução da doença periodontal, através da colocação do fio de seda em volta do segundo molar superior direito. Ao final do período experimental (50 dias) os animais foram submetidos à eutanásia. O nível de inserção histológica (Jac-E) e perda óssea histológica (Jac-O) foram mensurados.Resultados: Entre os grupos B e S, não houve diferenças estatisticamente significativas para Jac-E e Jac-O. Entretanto, notaram-se diferenças significativas em ambos os parâmetros avaliados quando o grupo C foi comparado aos grupos B e S. Conclusão: Pode-se concluir que o uso prolongado de betametasona não modificou a progressão de periodontite induzida.

Influence of arterial hypertension on colonic healing in rats / Influência da hipertensão arterial na cicatrização colônica em ratos

PURPOSE: Evaluation of colonic healing in spontaneously hypertensive rats. METHODS: Fifty male, young and inbred rats were used. Twenty-five Wistar Kyoto rats (WKY) as control and twenty-five spontaneously hypertensive rats (SHR) as an experimental group. Colotomy and bowel suture at 2.5 cm from the peritoneal reflection were performed. All animals were allocated randomly into sub-groups for review at the third, seventh and fourteenth days after surgery. We evaluated the concentration of angiotensin II, the burst pressure, epithelialization, the organization of the tunics of the bowel wall, inflammatory response and collagen deposition. RESULTS: The burst pressure, epithelialization, organization of the tunics and collagen deposition was not significant between groups. The inflammatory reaction was more intense in the control group on the third postoperative day (p=0.023) as the experimental group on the remaining time. CONCLUSION: Systemic arterial hypertension in rats did not influence significantly the healing process of colonic anastomoses.

OBJETIVO: Avaliar a cicatrização colônica em ratos espontaneamente hipertensos. MÉTODOS: Cinquenta ratos machos, jovens e isogênicos. Vinte e cinco ratos da linhagem Wistar Kyoto (WKY) como controle e vinte e cinco ratos espontaneamente hipertensos (SHR) como grupo experimento. Realizou-se colotomia e colorrafia a 2,5 cm da reflexão peritoneal. Alocaram-se os animais aleatoriamente em sub-grupos para avaliação no terceiro, sétimo e décimo quarto dias de pós-operatório. Foram avaliados a concentração de angiotensina II, a resistência da anastomose à insuflação, a epitelização, a organização das túnicas da parede intestinal, a reação inflamatória e a deposição de colágeno. RESULTADOS: A avaliação da resistência da anastomose, epitelização, organização das túnicas e deposição de colágeno não foi significativa entre os grupos. A reação inflamatória foi mais intensa no grupo controle na avaliação do terceiro dia de pós-operatório (p=0,023) igualando-se ao grupo experimento nos demais tempos. CONCLUSÃO: A hipertensão arterial sistêmica, em ratos, não influenciou de forma significante no processo cicatricial de anastomoses do cólon.

Estudo do efeito do TERPY [Ru(terpy)(bdq)NO+]3+, um novo doador de óxido nítrico, na reatividade vascular e na pressão arterial de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) / Study of the effect of TERPY [Ru (terpy) (bdq) NO +] 3 +, a new nitric oxide donor, vascular reactivity and blood pressure in spontaneously hypertensive rats (SHR)

O uso clínico de drogas que liberam óxido nítrico (NO) é limitado por seus efeitos colaterais. A hipotensão induzida pelo doador clássico de NO, nitroprussiato de sódio (NPS) é rápida, transiente e induz à taquicardia reflexa, o que pode ser um efeito indesejável em pacientes com doença cardíaca e uma limitação para a terapia anti-hipertensiva. Este estudo avaliou o efeito hipotensor e vasodilatador do novo doador de NO [Ru(terpy)(bdq)NO+]3+ (TERPY) e comparou com os resultados obtidos com o NPS em ratos Wistar e ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Em outra parte do estudo, foram estudadas diferenças no mecanismo de ação desta droga entre aortas de SHR jovens e velhos. Diferente do observado para o NPS, a hipotensão induzida pelo TERPY é lenta, duradoura e não leva a alterações da frequência cardíaca. Além disso, o TERPY libera quantidades semelhantes de NO em aortas de SHR e Wistar, induzindo relaxamento parcialmente dependente de GCs em ambos os grupos, ao contrário do NPS, que libera mais NO em aortas de SHR e também é mais potente e eficaz em aortas desses animais. Fatores como o estresse oxidativo e a atividade da PDE5 são importantes para o relaxamento do TERPY em SHR, mas a inibição da PDE5 não aumenta a potência do TERPY em aortas de ratos Wistar. Além disso, o relaxamento induzido pelo TERPY é mais potente em anéis de aorta de SHR velhos do que novos. Os mecanismos de ação do TERPY são semelhantes nas aortas desses animais, mas, interessantemente, a incubação com Apocinina aumenta a potência do TERPY em aortas de SHR jovens, mas não de velhos. Em conjunto, estes dados demonstram que o composto TERPY é um doador de NO que possui vantagens em relação ao NPS. Além disso, é mais potente em aortas de animais hipertensos velhos, o que é mais uma vantagem para sua utilização e um incentivo para a realização de novos estudos que possam contribuir para entender melhor seu mecanismo de ação

The clinical use of nitric oxide (NO) releasing drugs is limited by their harmful effects. The hypotension induced by the classic NO donor, sodium nitroprusside (SNP) is fast, transient and induces reflex tachycardia, which can be an undesirable effect in patients with heart disease and a limitation for the anti-hypertensive therapy. This study evaluated the hypotensive and vasodilatory effects of the new NO donor [Ru(terpy)(bdq)NO+]3+ (TERPY) in Wistar rats and spontaneously hypertensive rats (SHR). In another part of the study, we investigated the differences in the mechanism of action of this drug between aortas of young and old SHR. Different from what is observed for SNP, the hypotension induced by TERPY is slow, long lasting and doesn’t lead to alterations in the heart rate. Besides, TERPY releases similar amounts of NO in SHR and Wistar aortas, inducing a relaxation partially dependent on GCs in both groups, contrary to SNP, which releases more NO in aortas of SHR and is also more potent and efficient in the aortas of these animals. Factors as oxidative stress and the activity of PDE5 are important to the relaxation of TERPY in SHR, but the inhibition of PDE5 doesn’t increase the potency of TERPY in aortas of Wistar rats. Furthermore, the relaxation induced by TERPY is more potent in aortas of old SHR than of young ones. The mechanisms of action of TERPY are similar in the aortas of both groups, but, interestingly, the incubation with Apocynin increases the potency of TERPY in aortas of young SHR, but not of old ones. Taken together, these data show that the compound TERPY is a NO donor that has advantages in relation to SNP. Moreover, it’s more potent in aortas of old hypertensive animals, which is another advantage for its use and an incentive for the elaboration of new studies that could contribute to understand its mechanism of action

Can Wistar rats be used as the normotensive controls for nerve morphometry investigations in spontaneously hypertensive rats (SHR)? / Ratos Wistar podem ser utilizados como os controles normotensos dos ratos espontaneamente hipertensos (SHR) em investigações morfométricas de nervos periféricos?

PURPOSE: We compared the sural nerve morphology among Wistar (WR), Wistar-Kyoto (WKY) and Spontaneously hypertensive (SHR) rats, including the nerve fascicles and myelinated fibers morphometry. METHODS: Age matched (20 weeks) female WR (N=6), WKY (N=6) and SHR (N=7) had their right and left sural nerves removed, embedded in epoxy resin, and observed by light microscopy. Morphometric analysis was performed with the aid of computer software. RESULTS: Despite presenting the same age, WR were heavier than WKY and SHR, as were SHR compared to WKY. Systolic arterial pressure was higher in SHR compared to WR, but no differences between SHR and WKY or WR and WKY were observed. The sural nerves were morphometrically symmetric between proximal and distal segments on the same side and between sides in all strains with no differences in the myelinated fiber number. Schwann cell number and density were smaller in SHR and G ratio was larger in SHR, indicating that SHR have thinner myelinated fibers. CONCLUSION: Sural nerve morphology is similar between WKY and WR, allowing the use of WR as the SHR controls in morphological investigations involving peripheral neuropathies.

OBJETIVO: Comparar a morfologia do nervo sural em ratos Wistar (WR), Wistar Kyoto (WKY) e espontanemanete hipertensos (SHR), incluindo a morfometria dos fascículos e fibras mielínicas. MÉTODOS: Os nervos surais direito e esquerdo de WR (N=6), WKY (N=6) e SHR (N=7), com 20 semanas de idade foram removidos e preparados para inclusão em resina epóxi e microscopia de luz. A morfometria foi realizada com o auxílio de um programa de computador. RESULTADOS: Apesar de apresentarem a mesma idade, WR são mais pesados que os WKY e SHR. Ainda, SHR são mais pesados que os WKY. A pressão arterial sistólica foi significativamente maior nos SHR comparados aos WR, sem diferença entre WKY e SHR ou WR e WKY. Os nervos surais são morfometricamente simétricos entre segmentos proximal e distal e entre lados direto e esquerdo nas três diferentes linhagens, sem diferença no número de fibras mielínicas. O número e a densidade de células de Schwann foram menores e a razão G foi maior nos SHR, indicando a presença de fibras mielínicas com bainha mais fina. CONCLUSÃO: A morfologia do nervo sural é semelhante ente WR e WKY, permitindo o uso de WR como controles dos SHR nas investigações envolvendo neuropatias periféricas.

Efeito da sobreposição de um modelo de obesidade neuroendócrina experimental e hipertensão arterial sobre a pressão arterial, peso corporal e parâmetros metabólicos e renais de ratos / Effects of the overlapping between an experimental model of neuroendocrine obesity with arterial hypertension under blood pressure, body weight and metabolic and renal parameters in rats

INTRODUÇÃO: A elevação do índice de massa corporaleapresençadesíndromemetabólica se associam com diminuição da função renal e o aparecimento de doença renal terminal. OBJETIVO: Avaliar o efeito da sobreposição de um modelo de obesidade experimental e hipertensão arterial sobre a pressão arterial, peso corporal e parâmetros metabólicos e renais de ratos. MÉTODOS: Foram estudados ratos machos das cepas Wistar e espontaneamente hipertensos (SHR). Os grupos MSG receberam glutamato monossódico no período neonatal (WST + MSG e SHR + MSG). Os animais controles receberam salina no período neonatal (WST e SHR). Após completarem três meses de vida, por 12 semanas foram pesados e tiveram a pressão arterial de cauda aferida semanalmente. A determinação de microalbuminúria foi realizada nas semanas 0, 4, 8 e 12. Ao final do período de acompanhamento, coletou-se sangue para glicemia de jejum, creatinina e perfil lipídico. Os rins foram retirados, corados e o índice de esclerose glomerular foi calculado. RESULTADOS: A administração de MSG produziu maior ganho percentual de peso corporal, elevação da glicemia de jejum e maior grau de lesão glomerular nos ratos WST -MSG e SHR -MSG quando comparados aos seus controles. Houve maior excreção urinária de albumina nos ratos do Grupo SHR + MSG quando comparados aos SHR. Não houve diferença estatística na pressão arterial de cauda, creatinina e parâmetros do metabolismo lipídico. CONCLUSÕES: A associação de obesidade neuroendócrina e a hipertensão arterial promoveram alterações morfológicas e funcionais no glomérulo mais severas do que aquelas observadas nos ratos somente hipertensos.

INTRODUCTION: Increased body mass index and the metabolic syndrome are associated with decreased renal function and the development of end-stage kidney disease. OBJECTIVE: To evaluate the effect of the overlap between an experimental model of obesity and genetic hypertension on the blood pressure, body weight and metabolic and kidney parameters of rats. METHODS: We studied male rats of the Wistar (WST) and spontaneously hypertensive rats (SHR) strains. Monosodium glutamate (MSG) was administered in the neonatal period to both strains, to make up two groups: WST + MSG and SHR + MSG. Animals in the control groups (WST and SHR) received saline. After completing three months of life, a 12-week follow-up period ensued, during which bi-weekly measurements of body weight (BW) and tail-cuff blood pressure (TCBP) were obtained. Microalbuminuria was analyzed at weeks 0, 4, 8 and 12. At the end of the follow-up period, blood was obtained for fasting glucose, plasma creatinine, and lipid profile determinations. The kidneys were removed, stained, and the glomerular sclerosis index was calculated. RESULTS: The administration of MSG produced higher percentage body weight gain, higher fasting blood glucose and a higher degree of glomerular injury in WST-MSG and MSG-SHR rats, compared to their controls. Greater urinary albumin excretion was observed in SHR + MSG rats, when compared to SHR. There was no statistical difference in the TCBP, creatinine, and lipid profile. CONCLUSIONS: The association of neuroendocrine obesity and arterial hypertension promoted morphological and functional changes in the glomerulus. These changes were more severe than those observed in hypertensive-only rats.

Avaliação da função hepática de ratas da linhagem Lewis frente à ingestão de álcool associada a periodontia induzida por ligadura / Evaluation of liver function in wistarfemale Lewis ahead of alcohol associated with ligature-induced periodontitis

Objetivo: o presente estudo tem por objetivo avaliar a função hepática frente à ingestão de álcool associado com a periodontite induzida por ligadura em ratas Lewis. Materiais e Métodos: os 24 animais foram divididos nos grupos: álcool+ligadura-GA (n=8), ligadura-GL (n=8) e controle negativo -GCN (n=8). Para a análise dos resultados foram adotados os parâmetros bioquímicos – aspartato aminotransferase (ASTTGO) e transaminase glutâmica pirúvica (ALTTGP). Os animais foram submetidos à ingestão de solução alcoólica a 20%, ao longo de um período de 60 dias. Para o procedimento de indução da doença periodontal, os animais do GA e GL receberam anestesia geral. Resultados: os resultados do trabalho demonstraram ausência de diferença estatística (p>0,05) para as variáveis ASTTGO e ALTTGP paras os grupos GA, GL e GCN. Conclusão: conclui-se que a ingestão de álcool na dosagem praticada, associado à periodontite induzida por ligadura não modificou os exames de bioquímica ASTTGO e ALTTGP em ratas Lewis.

Objective: This study aims to assess liver function before the intake of alcohol associated with ligature-induced periodontitis in rats Lewis. Materials and Methods: These 24 animals were divided into two groups: alcohol + GA-ligation (n = 8), ligation-GL (n = 8) and negative control-GCN (n = 8). For the analysis of the results were used biochemical parameters – aspartate aminotransferase (AST AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT TGP). The animals were submitted to the ingestion of alcoholic solution at 20% over a period of 60 days. For the induction of periodontal disease, animals in the GL and GA general anesthesia. Results: The results demonstrated no statistical difference (p> 0.05) for the variables AST AST and ALT TGP paras the GA, GL and GCN. Conclusion: We conclude that alcohol intake at a dose practiced, associated with ligature-induced periodontitis did not modify the biochemical tests AST AST and ALT TGP Lewis in rats.

Avaliação do efeito do atenolol no processo de reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) / Evaluation of atenolol effect in alveolar healing process in spontaneously hypertensive rats (SHR)

A hipertensão arterial representa um fator de risco sistêmico e condição desfavorável para tratamentos dentários, especialmente aqueles que necessitam de reparação óssea. O objetivo deste estudo foi avaliar o reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e o efeito do atenolol sobre este processo. Wistar e SHR tratados ou não com 100mg/kg/dia (atenolol), foram submetidos à extração do dente incisivo superior direito e sacrificados aos 7, 14, 21, 28 e 42 dias após a cirurgia. As hemi-maxilas foram removidas e as imagens radiográficas foram realizadas. A análise radiográfica foi obtida por meio do sistema digital Digora. Análises histológicas, histomorfométricas e reações imunoistoquímicas foram feitas em cortes histológicos de 5μm de espessura, os quais foram corados com hematoxilina-eosina ou submetidos à imunomarcação para RANK, RANKL, OPG e proteínas MMP-9. A análise histológica foi realizada por microscopia óptica e a análise histomorfométrica pelo software RGB / Leica Qwin Color. Os resultados densitométricos e histomorfométricos foram analisados pela Anova two-way. Na análise imunoistoquímica, utilizando um microscópio óptico, foram atribuídos scores às imagens. Os resultados foram analisados pelos testes estatísticos Kruskal-Wallis e Mann Whitney. As diferenças entre os resultados foram consideradas significativas quando p<0,05. Redução da densidade mineral óssea (DMO), menor porcentagem de osso e menor espessura do trabeculado ósseo foram observadas nos períodos finais do reparo alveolar em SHR. Aumento da imunomarcação para RANKL, RANK e MMP-9 foi observado em 28 dias após a cirurgia no alvéolo em SHR. Consistente efeito do atenolol foi observado no reparo alveolar de ratos hipertensos. O atenolol aumentou a DMO observada na maioria dos períodos analisados e aumentou a espessura do trabeculado ósseo nos 28º e 42º dias em alvéolos de SHR. Aumento na marcação para OPG aos 7º e 42º dias do reparo foram observados em SHR tratados. Aumento na...

Hypertension represents a systemic risk factor and unfavorable condition for dental treatments, especially treatments that require bone healing. The purpose of this study was to evaluate the alveolar wound healing in spontaneously hypertensive rats (SHR) and the atenolol effect on this process. Normotensive Wistar rats and SHR, untreated or treated with atenolol (100mg/kg/day), were submitted to the extraction of the upper right incisive tooth and sacrificed at 7, 14, 21, 28 and 42 days after surgery. The hemi-jaws were extracted and the radiographic images were obtained. Radiographic analysis was performed by using the digital system Digora. Histological, histomorphometric and immunohistochemical reactions were done in histological sections, 5 μm thick, stained with hematoxylin and eosin or subjected to immunolabeling to RANK, RANKL, OPG and MMP-9 proteins. Histological analysis was performed by light microscopy and histomorphometric analysis by Leica Qwin Color/RGB software. The densitometric and histomorphometric results were also analyzed by two-way ANOVA. In immunohistochemical analysis, using an optical microscopy, scores were assigned to the images. Results were analyzed by KruskalWallis and Mann Whitney statistical tests. Differences between results were considered significant when p <0.05. Reduced bone mineral density (BMD), lower bone percentage and less thickness of trabecular bone was observed in the final periods of alveolar bone healing in SHR. Increased RANKL, RANK and MMP-9 immunolabeling were observed at 28 days after surgery in SHR alveolus. Consistent atenolol effect was observed on alveolar bone healing of hypertensive rats. Atenolol increased the BMD observed in most of the periods analyzed and increased trabecular bone thickness at 28 and 42 days in SHR alveolus. Increased OPG immunolabeling at 7 and 42 days of alveolar healing were observed in treated SHR. Increased expression of RANKL and MMP-9 at 21 and 42 days, and increased RANK…

Efeito da ingestão crônica de álcool na progressão de periodontite induzida em ratos da linhagem Fischer-344 / Effect of chronic alcohol ingestion on the progression of periodontitis induced in Fisher-344 rats

Objetivo: Compreender o efeito do uso crônico de álcool na progressão de periodontite induzida em ratos da linhagem Fischer-344. Métodos: Para o estudo utilizaram-se 22 ratos da linhagem Fischer-344, com dois meses de idade, divididos nos grupos: álcool (n=8), ligadura (n=7) e controle (n=7). No primeiro dia, expuseram-se os animais do grupo álcool à ingestão de solução de água com álcool a 20% (volume/volume), até o dia 90. Decorridos trinta dias do início do experimento, os animais do grupo álcool e do grupo ligadura submeteram-se à colocação de fio de seda em volta do segundo molar superior direito. Nada foi realizado no lado esquerdo, servindo como controle. Todos os grupos submeteram-se à eutanásia, após 60 dias da colocação da ligadura. Para avaliar a destruição da periodontite, usou-se o exame radiográfico, mensurando a destruição da altura óssea. Resultados: Os resultados do estudo evidenciaram que, no lado em que foi induzida a periodontite, o grupo que ingeriu álcool sofreu um aumento de destruição, demonstrando diferenças estatísticas (p < 0,05), se comparado ao grupo ligadura e ao controle. E, maior destruição óssea no grupo ligadura quando comparado ao controle (p < 0,05). Conclusão: Conclui-se, dentro das limitações do estudo, que o consumo crônico de álcool por ratos da linhagem Fischer-344 induziu a uma maior progressão de periodontite induzida.

Objective: Understand the effect of chronic alcohol on the progression of periodontitis induced in Fischer-344 rats. Methods: For the study, 22 Fischer-344 rats, two months old were used, divided into groups: alcohol (n=8), ligature (n=7) and control (n=7). On the first day, the animals in the alcohol group were exposed to ingestion of a water solution containing 20% alcohol (size/size), up to day 90. After thirty days from the beginning of the experiment, the animals in the alcohol group and the ligature group were submitted to the placement of a silk thread around the right maxillary second molar. Nothing was performed on the left side, serving as control. All the groups were submitted to euthanasia 60 days after ligature placement. To assess the destruction of periodontitis, a radiographic exam was used to measure the destruction of bone height. Results: The results of the study showed that on the side in which periodontitis was induced, the group that ingested alcohol suffered an increase in destruction, with statistical differences when compared with the ligature and control groups and increased bone destruction in the ligature group when compared to control. Conclusion: Within the limitations of the study, it was concluded that chronic alcohol consumption by Fischer-344 rats led to greater progression of induced periodontitis.

Ação local do alendronato sódico na reparação óssea de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) / Local action of sodium alendronate in bone repair of spontaneously hypertensive rat (SHR)

FUNDAMENTO: A hipertensão arterial é uma desordem caracterizada por alterações relevantes no tecido ósseo. O alendronato sódico tem indicação no tratamento de doenças ósseas, por causa de sua afinidade pela hidroxiapatita, inibindo as reabsorções ósseas. OBJETIVO: Analisar a ação local do alendronato sódico na reparação óssea de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). MÉTODOS: Um defeito ósseo foi criado no fêmur esquerdo de 80 ratos. De acordo com o material utilizado no local, criaram-se quatro grupos: controle (C), amido (Am), alendronato 1 mol (A1) e alendronato 2 mol (A2). Após 7 e 21 dias, os animais foram sacrificados. Foram realizadas análises histológicas e histomorfométricas e os dados foram submetidos a análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey (5 por cento). RESULTADOS: Aos 7 dias, observou-se, na área do defeito, tecido conjuntivo com hemorragia e inflamação em todos os grupos. Alguns apresentavam matriz osteóide. Os grupos A1 e A2 apresentaram, ainda, uma rede de fibrina. Aos 21 dias, as trabéculas ósseas fechavam praticamente a extensão do defeito nos grupos C e Am. No grupo A1 de animais machos, observaram-se trabéculas que se irradiavam do canal medular até a área do defeito. Nos grupos A1 e A2, constatou-se apenas a presença de tecido conjuntivo com mínima deposição de osteóide. Um achado histológico marcante foi a formação de tecido ósseo extracortical subperiosteal nos animais dos grupos A1 e A2. CONCLUSÃO: Concluiu-se que a administração do alendronato sódico não contribuiu para o reparo ósseo nos ratos SHR, mas possivelmente tenha sido responsável pelas formações ósseas extracorticais observadas.

BACKGROUND: The arterial hypertension is a disorder characterized by relevant alterations in the bone tissue. The sodium alendronate is indicated in the treatment of bone diseases, because of its affinity with the hydroxyapatite, inhibiting the bone reabsorptions. OBJECTIVE: To analyze local action of the sodium alendronate in the bone repair of spontaneously hypertensive rat (SHR). METHODS: A bone defect was created in the left femur of 80 rat. In agreement with the material used at the place, four groups were created: control (C), starch (St), alendronate 1 mol (A1) and alendronate 2 mol (A2). After 7 and 21 days, the animals were sacrificed. Histomorfometrical and histological analyses were accomplished and the data were submitted the variance analysis (ANOVA) and test of Tukey (5 percent). RESULTS: At 7 days, in the area of the defect, conjunctive tissue with hemorrhage and inflammation in all of the groups was observed. Some presented osteoid matrix. The groups A1 and A2 presented, further, a fibrin net. At 21 days, the bone trabeculae practically closed the extension of the defect in the groups C and St. In the group A1 of male animals, trabeculae were observed that irradiated from the medullary canal to the area of the defect. In the groups A1 and A2, only presence of conjunctive fabric with low osteoid deposit was observed. An outstanding histological discovery was the formation of extracortical subperiosteal bone tissue in animals of the groups A1 and A2. CONCLUSION: The administration of sodium alendronate did not contribute to bone repair in SHR rat, but possibly has been responsible for the extracortical bone formation observed.